蜘蛛大部分都有毒腺，螯肢和螯爪的活动方式有两种类型，穴居蜘蛛大多都是上下活动，在地面游猎和空中结网的蜘蛛，则如钳子一般的横扫。
无触角，无翅，无复眼，只有单眼，一般有8个眼，但亦有6、4、2眼者，个别属甚至没有眼，就眼的色泽和功能而言，又分夜和昼两种。
蜘蛛的口器，由螯肢、触肢茎节的颚叶，上唇、下唇所组成，具有毒杀、捕捉、压碎食物，吮吸液汁的功能。
有些蜘蛛的跗节爪下，有由粘毛组成的毛簇，毛簇有使蜘蛛在垂直的光滑物体上爬行的能力。结网的蜘蛛，跗节近顶端有几根爪状的刺，称为副爪。
大多数蜘蛛的腹部不分节。有无外雌器是鉴定雌体种的重要特征。在腹部腹面中间或腹面后端具有特殊的纺绩器，三对纺绩器按其着生位置称为前、中、后纺绩器，纺绩器的顶端有膜质的纺管，周围被毛，不同蜘蛛的纺管数目不同，不同形状的纺管，纺出不同的蛛丝，纺管的筛器，也是纺丝器官，像隆头蛛科的线纹帽头蛛的筛器上有9600个纺管，可见其纺出的丝是极其纤细的。
经由纺管引出体外的丝腺有8种，丝腺的大小及数目随蜘蛛的成长和逐次蜕皮而增加。蜘蛛丝是一种骨蛋白，十分粘细坚韧而具弹性，吐出后遇空气而变硬。
蜘蛛多以昆虫、其他蜘蛛、多足类为食，部分蜘蛛也会以小型动物为食。跳蛛视力佳，能在30厘米内潜近捕获猎物，猛扑过去。蟹蛛在与其体色相近的花上等候猎物。穴居在土中的地蛛筑衬以丝的地穴，洞口有夜间打开的活盖，捕食从洞口经过的昆虫。
蜘斗蛛织漏斗网，昆虫落网即引起振动；蜘蛛本身居于丝管内，末端窄而通入植物丛或石缝中。
大多数圆蛛用最少的丝织成面积最大的网，网像一个空中滤器，陷捕未看见细丝的、飞行力不强的昆虫。网虽复杂，但一般在1小时内即能织成，多在天亮前完成。若网于捕食时破坏，则另织一新网。织圆网时，蜘蛛放出一丝，随风飘荡。如果丝的游离端未能黏在某物上，则蜘蛛把丝拉回吃掉。若该丝牢固地黏在某物上，则蜘蛛从该丝桥上通过，再以丝将它加固。
蜘蛛在桥的中央固着一丝，自身坠在一条丝上往下垂，到地面上或另一树枝上，把此丝黏着。蜘蛛回到中心，拉多根从网中心向四周辐射的辐射丝。然后，蜘蛛爬回网中心，从里向外用乾丝拉临时的螺旋丝，各圈螺旋丝之间间距较大。
然后蜘蛛爬到最外围，自外向网中心安置带黏性的较紧密的捕虫螺旋丝。一边结，一边把先前结的不带黏性的乾螺旋丝吃掉。网全部完工后，有的蜘蛛从网中心拉一根丝爬到网的一角的树叶中隐蔽起来。
若有昆虫投网，透过信号丝的振动便可闻讯而来取食。有的蜘蛛头朝下留在网中心，等候猎物，有猎物时先用丝将其缠绕，再叮咬之并将其携回网中心或隐蔽处进食或贮藏。蝶蛾类较大，易于逃脱，故先叮咬后用丝捆缚。有的蜘蛛结共用网，如加彭的社会漏斗蛛筑一大网，几百只蜘蛛共同捕食。
蜘蛛在控制某些昆虫的种群上可能起重要的作用。有几种毒蛛的神经毒对人有毒性。织网过程引起科学上的兴趣，并已用于研究影响神经系统的药物。
说实话如果被有毒的蜘蛛咬了一下还真不好受，虽然这里是医院，但是目前华夏的医院还真没有多少有专门应对蜘蛛的抗毒血清，因为目前来看华夏的大部分地区的蜘蛛都是没有毒的。